芋头凝集素的提取方法
芋头凝集素的提取方法主要包括以下步骤:
浸泡与超声处理
将尖尾芋粗粉用磷酸盐缓冲液浸泡1小时。
以240W的功率进行超声处理10分钟。
滤过并收集滤液,然后离心以收集上清液。
第一次沉淀
在上清液中加入固体硫酸铵,直至饱和度达到90%,使蛋白沉淀。
离心收集沉淀,并进行透析除盐处理。
将得到的沉淀物进行冷冻干燥,得到凝集素粗品一。
离子交换层析
将凝集素粗品一溶解于水中,通过DEAE-52离子交换层析柱。
依次使用0.05mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L的氯化钠溶液进行洗脱。
收集第三个洗脱峰,并进行透析除盐及冷冻干燥,得到纯化的凝集素。